褪黑素及中药复方抗雄性鼠前列腺炎作用的研究

褪黑素（Meatonin，MT）是松果腺于夜间分泌的、普遍存在于生物体内的一种吲哚类激素，在体内起重要的生理作用。MT具有明显的昼夜节律性及明暗周期。MT对机体有着广泛的影响，具有调节免疫、抗氧化、抗炎、镇痛、镇静、催眠、抗衰老等作用，未见其治疗前列腺炎的国内外报道。本实验中药复方（Compound Chinese Traditiona Medicine，CCTM）源自金匮肾气丸(古成方)，有补肾壮阳之功效。PS指前列腺非特异性感染所致的急性或慢性炎症引起的局部和全身症状，是男性常见病。本实验以褪黑素及中药复方合用对雄性鼠进行口服灌胃给药，通过考察前列腺腺体器官的重量及指数、卵磷脂小体的密度、白细胞总数以及其组织病理切片等实验的检测，对MT及CCTM抗前列腺炎的作用及机制进行分析讨论。

1 实验材料

1.1 实验动物 Wistar大鼠，雄性250g左右，由沈阳药科大学动物室提供。

1.2 实验药品和试剂 熟地黄（Radix Rehmanniae preparata）、黄芪(Radix astragai)、茯苓(Poria)、肉桂(Cortex cinnamomi)、枸杞(Fructus ycii)、山茱萸(Fructus corni)等：购自沈阳同仁堂大药房；褪黑素（meatonin）：江苏常州医药技术开发公司；前列康：浙江康恩贝制药股份有限公司(批号：021029-3)；角叉菜胶(Carrageenin)：美国SIGMA公司。

2 实验方法

2.1 实验模型的建立 角叉菜胶致大鼠实验性非细菌性前列腺炎模型[3～7]。按张氏造模方法，取Wistar雄性大鼠40只，体重250g左右，每鼠分别称重，按体重腹腔注射10%乌拉坦，1m/100g，待麻醉成功后，剪除下腹部被毛，无菌条件下，于下腹部正中切口，直达腹腔，提起膀胱，暴露前列腺腹叶，以1%灭菌角叉菜胶溶液0.1m注入腹叶，送复脏器，缝合肌肉、皮肤。将 40只造模大鼠随机分为4组，每组8只，即褪黑素组、褪黑素中药复方组、模型对照组、前列康片对照组，另取8只未造模大鼠作为正常对照组。造模后7天开始给药。模型对照组灌胃给予蒸馏水10m/kg，实验组灌胃给予褪黑素8.0mg/kg、褪黑素中药复方9.72g/kg；阳性对照组灌胃给予前列康片417mg/kg。每组每日晚5：00灌胃给药一次，空白组不予处理。连续1周，于第8天给药后1h，将各组动物处死，摘取前列腺，取10μ前列腺按摩液，用白细胞稀释液稀释20倍，于显微镜下数白细胞数。另取1滴前列腺液涂片，镜下观察卵磷脂小体密度（按临床检验标准分为4级，即满视野为4级，3/4 视野为3级，1/2视野为2级，1/4视野为1级）。记录结果，用t检验进行统计学处理。

2.2 检测方法

2.2.1 前列腺指数及性腺器官指数的测定[9，10] 大鼠称重，然后处死，取前列腺称重。前列腺指数=前列腺重/体重。

2.2.2 前列腺液的检测[11，12] 用前列腺按摩法采取前列腺液。正常前列腺液为稀簿乳白色液体，镜检：有很多卵磷脂小体，每高倍视野白细胞数在4个以下，偶见精子。前列腺炎时，白细胞或脓细胞每高倍视野4个以上，卵磷脂小体减少，偶可查到滴虫。在显微镜下检查可见以下几种成分：(1)卵磷脂小体：正常前列腺液内卵磷脂小体几乎布满视野，当前列腺发生炎症时，巨噬细胞吞噬大量脂类，故卵磷脂小体减少。因此，卵磷脂小体的多少，在一定程度上反映前列腺炎的轻重。(2)血细胞：正常前列腺液内红细胞极少，往往在炎症时才出现，如按摩过重也引起红细胞数增加；正常前列腺液内白细胞散在，每高倍视野下不超过4个。

2.3 切片的制作 用颈椎脱臼法处死大鼠，立即打开腹腔，摘取前列腺，取部分组织，福尔马林溶液固定，常规石蜡包埋切片(6μm)，HE染色后，光镜观察，每组随机取5张切片，每张随机选择5个视野。

2.4 数据处理 数据采用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验进行统计学处理。

3 结果

3.1 MT、MT中药复方对角叉菜胶所致实验性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺重量及指数的影响 见表1。MT组、MT中药复方组及前列康组大鼠的前列腺组织的重量和指数与模型组比较差异有显著性（P＜0.01），模型组与空白组相比差异有显著性（P＜0.01）。MT组与模型组比较差异不明显。提示：实验性非细菌性前列腺炎大鼠模型成立，MT、MT中药复方及前列康对实验性非细菌性前列腺炎大鼠的炎症有一定的抑制作用。

Tab.1 Effects of MT、MT+CCTM on abacteria prostatitis induced by carrageenin in rats (x±s)

Annotation：Compared with contro group：▲▲P＜0.01；Compared with mode group：P＜0.05；*P＜0.01

3.2 MT、MT中药复方对角叉菜胶所致实验性非细菌性前列腺炎大鼠卵磷脂小体密度及白细胞总数的影响 见表2。MT组、MT中药复方组及模型组大鼠的前列腺组织的卵磷脂小体密度与模型组比较差异有显著性，前列康组、MT中药复方组与模型组相比差异有显著性（P＜0.01）。MT组与模型组比较差异不明显。MT组、MT中药复方组及前列康组大鼠的前列腺液的白细胞总数(个/HP)与模型组比较均有差异。MT中药复方组及前列康组差异显著（P＜0.01）。提示：MT对角叉菜胶所致实验性非细菌性前列腺炎大鼠的前列腺炎有一定的抑制作用，MT中药复方及前列康的作用较MT中药复方低剂量显著。

Tab.2.Effects of MT+CCTM on abacteria prostatitis induced by carrageenin in rats (x±s)

Annotation：Compared with contro group：▲▲P＜0.01；Compared with mode group：P＜0.05；*P＜0.01